保健食品中超氧化物歧化酶（sod）活性的测定
（本法参照gb/t5009·171-2003）
一、原理
将25℃时抑制邻苯三酚自氧化速率50%所需的sod定义为一个活力单位。在碱性条件下，邻苯三酚会发生自氧化，可根据sod抑制邻苯三酚自氧化能力测定sod活力。
二、试剂
1、a液：ph8.200.1mol/l三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液（内含1mmol/ledta·2na）。称取1.2114g三羟甲基氨基甲烷和37.2mgedta·2na溶于62.4ml0.1mol/l盐酸溶液中，用蒸馏水定溶至100ml。
2、b液：4.5mmol/l邻苯三酚盐酸溶液。称取邻苯三酚56.7mg溶于少量10mmol/l盐酸溶液，并定容至100ml。
3、盐酸溶液：10mmol/l
4、蒸馏水：二重石英蒸馏水。
三、仪器
1、紫外-可见分光光度计；
2、精密酸度计，0.01ph；
3、离心机；
4、10ml比色管；
5、10ml离心管；
6、玻璃乳钵。
四、测定步骤
1、取茶叶样品1.00g置于研钵中，加入9.0ml蒸馏水研磨5分钟，移入10ml离心管。用少量蒸馏水冲洗研钵，洗液并入离心管中，加蒸馏水至刻度，经4000r/min离心15分钟，取上清液测定。
2、在25℃左右，于10ml比色管中依次加入a液2.35ml，蒸馏水2.00ml，b液0.15ml。加入b液立即混合并倾入比色皿，分别测定在325nm波长条件下初始时和1min后吸光度值，二者之差为邻苯三酚自氧化速率△a325（min-1）为0.060。
3、在25℃左右，于10ml比色管中依次加入20.0ul样液或酶液，a液2.35ml，蒸馏水2.00ml，b液0.15ml。加入b液立即混合并倾入比色皿，分别测定在325nm波长条件下初始时和1分钟后吸光度值，二者之差为样液或酶液抑制邻苯三酚自氧化速率△a′325（min-1）。加入样液或酶液的量使抑制邻苯三酚自氧化速率为1/2△a′325（min-1），即0.030。
五、计算结果
sod活力（u/g）=
式中：
v—加入样液或酶液的体积，ml
△a325—邻苯三酚自氧化速率
△a′325—样液或酶液抑制邻苯三酚自氧化速率
d—样液或酶液的稀释倍数
v1—样液总体积，ml
4.5—反应液总体积，ml
m—样液的质量，ml